無內毒素質粒大量提取試劑盒
更新時間:2010-10-24 | 點擊率:2824
無內毒素質粒大量提取試劑盒
目錄號 | 包裝 | 價格 | 產地 |
| 10次 | 400元 | Solarbio |
產品簡介:
本試劑盒采用可以特異性結合核酸的硅基質膜和堿裂解法提取細菌質粒DNA,從50-100ml大腸桿菌LB培養液中,可快速提取200-300μg純凈地高拷貝質粒DNA。所采用的內毒素清除劑能有效地去除質粒溶液中的內毒素,純化的質粒內毒素含量小于0.1EU/ug。吸附柱中采用的硅基質材料能、專一地吸附DNA,可大限度去除雜質蛋白質及細胞中其他有機化合物。使用本試劑盒提取的質粒DNA可適用于各種常規的分子生物學試驗,包括酶切、PCR、測序、連接、轉化和轉染等試驗。本試劑盒無需使用酚、氯仿等有毒試劑,操作安全。
產品包裝:
試劑盒組成 | 10次 | 儲存條件 |
RNase A | 750ul | -20℃ |
溶液P1 | 50ml | RT |
溶液P2 | 100ml | RT |
溶液P3 | 75ml | RT |
結合液 | 125ml | RT |
內毒素清除劑 | 25ml | RT |
漂洗液 | 15ml×2 | RT |
洗脫液 | 30ml | RT |
過濾柱 | 10個 | RT |
吸附柱 | 10個 | RT |
收集管 | 20個 | RT |
說明書 | 1份 | RT |
注意事項:
1、溶液P1在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA全部加入),混勻,置于2-8℃保存。
2、*次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在漂洗液中加入無水乙醇配制成工作液(如向15ml的漂洗液中加入60ml的無水乙醇)。
3、使用前請先檢查溶液P2和溶液P3是否出現混濁,如有混濁現象,可在37℃水浴中加熱幾分鐘,待溶液恢復澄清后再使用。溶液P2、溶液P3和漂洗液使用后應立即蓋緊蓋子,如非指明,所有離心步驟均為使用臺式離心機室溫下進行離心。
4、如果是提取革蘭氏陽性菌質粒,必須在裂解細胞前破細胞壁,方法如下:收集適量菌體,加入5ml溶液P1,充分懸浮菌體,加入溶菌酶至終濃度為10-20mg/ml,37℃處理30min左右。加入溶菌酶的濃度和處理時間可根據不同的菌株和具體試驗條件進行調整。
5、洗脫緩沖液的體積好不少于1ml,體積過小會影響回收效率;洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調至此范圍),pH值低于7.0會降低洗脫效率。
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